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科銳諾生物科技(查看)-分子病理技術(shù)服務(wù)

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原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,從而對(duì)特定核酸順序進(jìn)行精1確定量定位的過(guò)程。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。

原位雜交的特點(diǎn)是雜交在顯微鏡載玻片上中期染色體標(biāo)本上進(jìn)行。所謂原位即指標(biāo)本上DNA原位變性,在利用放1射性或非放1射性標(biāo)記的已知核酸探針雜交后,通過(guò)放1射自顯影或非放1射性檢測(cè)體系來(lái)檢測(cè)染色體上特異DNA或RNA順序,可用放1射性顆粒在某條染色體的區(qū)帶出現(xiàn)的頻率或熒光的強(qiáng)弱來(lái)確定探針的位置,從而進(jìn)行準(zhǔn)確的基因定位。

原位雜交的應(yīng)用范圍:

①細(xì)胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位,可用于基因圖譜,基因表達(dá)和基因組進(jìn)化的研究;

②感1染組織中病毒DNA/RNA的檢測(cè)和定位,如EB病毒mRNA、人類乳1頭狀瘤1病毒和巨細(xì)胞病毒DNA的檢測(cè);

③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測(cè);

④基因在染色體上的定位;

⑤檢測(cè)染色體的變化,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等;

⑥分裂間期細(xì)胞遺傳學(xué)的研究,如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定,某些腫1瘤的診斷和生物學(xué)劑量測(cè)定等。

分子病理應(yīng)用的檢測(cè)樣本主要包括石蠟組織、新鮮組織、脫落細(xì)胞、全血及其他體液等。石蠟切片標(biāo)本厚度應(yīng)在4-6μm,切片數(shù)量依據(jù)組織大小而定。樣本質(zhì)量對(duì)檢測(cè)結(jié)果和分析至關(guān)重要,病理醫(yī)師需要對(duì)可評(píng)估的樣本進(jìn)一步明確病理診斷,并評(píng)價(jià)標(biāo)本有無(wú)出血、壞死和不利于核酸檢測(cè)的前處理(例如含HCl脫鈣液處理),病變細(xì)胞(如細(xì)胞)的總量和比例,分子病理技術(shù)服務(wù),避免假陰性。進(jìn)行NGS檢測(cè)前需通過(guò)病理診斷明確其的性質(zhì)及含量,根據(jù)不同類型選擇合適的基因panel測(cè)序。組織標(biāo)本中細(xì)胞含量建議達(dá)到20%以上,低于此標(biāo)準(zhǔn)可富集后檢測(cè)。未經(jīng)病理評(píng)估的基因檢測(cè)結(jié)果不可單獨(dú)用于分子病理臨床診斷目的。

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