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染色體發(fā)現(xiàn)距今已有150多年的歷史,染色體檢測(cè)被廣泛用于動(dòng)、植物及人類的細(xì)胞遺傳學(xué)研究,隨著染色體分技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展。染色體研究范圍也不斷擴(kuò)大,植物組織RNA原位雜交檢測(cè)服務(wù),特別是用于腫1瘤分子診斷。腫1瘤細(xì)胞的染色體變化是一非常普遍的現(xiàn)象,可分為原發(fā)和繼發(fā)兩類。在腫1瘤形成的生物學(xué)基礎(chǔ)方面,原發(fā)性的染色體變化與引起腫1瘤的直接原因有關(guān),腫1瘤細(xì)胞中可以發(fā)現(xiàn)各種形式的染色體畸變,如缺失、重復(fù)、易位、重排、單體斷裂及核內(nèi)復(fù)1制等;繼發(fā)性變化主要是腫1瘤細(xì)胞核型的改變。染色體的檢測(cè)對(duì)于腫1瘤的診斷、鑒別診斷、生物學(xué)行為判別等方面都重要意義。染色體的檢測(cè)方法進(jìn)展很快,檢測(cè)的精1確率也不斷提高,

原位雜交的應(yīng)用范圍:

①細(xì)胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位,可用于基因圖譜,基因表達(dá)和基因組進(jìn)化的研究;

②感1染組織中病毒DNA/RNA的檢測(cè)和定位,如EB病毒mRNA、人類乳1頭狀瘤1病毒和巨細(xì)胞病毒DNA的檢測(cè);

③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)及其變化的檢測(cè);

④基因在染色體上的定位;

⑤檢測(cè)染色體的變化,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等;

⑥分裂間期細(xì)胞遺傳學(xué)的研究,如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定,某些腫1瘤的診斷和生物學(xué)劑量測(cè)定等。

FISH是原位雜交技術(shù)大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質(zhì)標(biāo)記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發(fā)明,現(xiàn)已從實(shí)驗(yàn)室逐步進(jìn)入臨床診斷領(lǐng)域?;驹硎菬晒鈽?biāo)記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復(fù)性;通過(guò)熒光顯微鏡觀察熒光信號(hào)可在不改變被分析對(duì)象(即維持其原位)的前提下對(duì)靶核酸進(jìn)行分析。DNA熒光標(biāo)記探針是其中常用的一類核酸探針。利用此探針可對(duì)組織、細(xì)胞或染色體中的DNA進(jìn)行染色體及基因水平 的分析。熒光標(biāo)記探針不對(duì)環(huán)境構(gòu)成污染,靈敏度能得到保障,可進(jìn)行多色觀察分析,因而可同時(shí)使用多個(gè)探針,縮 短因單個(gè)探針?lè)珠_(kāi)使用導(dǎo)致的周期過(guò)程和技術(shù)障礙。

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