通過(guò)分子檢測(cè)協(xié)助病理診斷
某些腫1瘤具有特定的分子病理學(xué)改變,對(duì)于病理常規(guī)染色難于診斷的這些腫1瘤,進(jìn)行分子病理檢測(cè)可協(xié)助得出準(zhǔn)確的病理診斷。例如淋巴1瘤的鑒別診斷往往依賴(lài)于形態(tài)和免1疫組化的綜合判斷,但有些時(shí)候,這些手段也不能滿(mǎn)足診斷的需要,這時(shí)我們通過(guò)IG或TCR基因重排檢測(cè),可協(xié)助鑒別淋巴細(xì)胞的普通增殖和腫1瘤性增殖。
分子病理檢測(cè)的意義
精1準(zhǔn)醫(yī)學(xué)時(shí)代的分子l靶向基因檢測(cè)
精1準(zhǔn)醫(yī)學(xué)概念的提出使各醫(yī)學(xué)學(xué)科在診療方式、治1療手段上都發(fā)生著翻天覆地的變化,但精1準(zhǔn)的治1療首先必須依托于精1準(zhǔn)的診斷,基因狀態(tài)檢測(cè)則是精1準(zhǔn)診斷的#步?;驒z測(cè)可以診斷疾病,也可以用于疾病風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)及指導(dǎo)腫1瘤靶向藥1物治1療?;驒z測(cè)是通過(guò)組織、血液、體液或細(xì)胞對(duì)DNA進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù),取被檢測(cè)者組織細(xì)胞,擴(kuò)增其基因信息后,通過(guò)特定設(shè)備對(duì)被檢測(cè)者細(xì)胞中的DNA分子信息作檢測(cè),預(yù)知身體患疾病的風(fēng)險(xiǎn),分析它所含有的各種基因情況,從而使人們能了解自己的基因信息。
后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液為1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室溫固定 10分鐘。蒸餾水洗滌3次。
原位雜交的預(yù)雜交:濕盒的準(zhǔn)備——干的雜交盒底部加20%甘油20ml以保持濕度。按每張切片20μι加預(yù)雜交液。恒溫箱38-42℃2—4小時(shí)。吸取多余液體,植物染色體原位雜交檢測(cè)技術(shù)服務(wù),不洗。
雜交——按每張切片20μι雜交液,加在切片上。將原位雜交專(zhuān)1用蓋玻片的保護(hù)膜揭開(kāi)后,蓋在切片上。恒溫箱38-42℃雜交過(guò)夜(根據(jù)雜交情況可以調(diào)節(jié))。
雜交后洗滌:揭掉蓋玻片,37℃左右水溫的2×SSC洗滌5分鐘×2次;37℃0.5×SSC洗滌15分鐘×1次; 37℃0.2×SSC洗滌15分鐘×1次(如果有非特異性染色,重復(fù)0.2×SSC洗滌15分鐘×1-2次)。
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