1,組化
實(shí)驗(yàn)原理:組化(IHC),是應(yīng)用抗原與特異性結(jié)合的原理,通過酶標(biāo)與底物反應(yīng)顯色,花芽原位雜交技術(shù)服務(wù),從而對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究,稱為組織化學(xué)技術(shù)。組化(IHC)具有特異性強(qiáng)、敏感度高、定位準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)。
1, 熒光
實(shí)驗(yàn)原理:熒光(IF),是應(yīng)用抗原與特異性結(jié)合的原理,通過熒光標(biāo)記對(duì)組織細(xì)胞內(nèi)抗原進(jìn)行定位、定性及定量的研究。目前皮諾飛生物主要可以對(duì)石蠟切片、冰凍切片、細(xì)胞爬片、組織芯片進(jìn)行熒光檢測(cè)。皮諾飛生物目前已突破傳統(tǒng)的熒光雙標(biāo)限制,開發(fā)出多色熒光技術(shù)(多可達(dá)7色)。
結(jié)1核病是嚴(yán)重威脅人類健康的傳1染性疾病,每年約有200萬人死于該病,其死1亡率在傳1染性疾病中僅低于艾1滋病,隨著醫(yī)1療診斷技術(shù)的迅猛發(fā)展,結(jié)1核病病理診斷經(jīng)歷了單一形態(tài)學(xué)和聯(lián)合特殊染色,到如今利用分子病理基因檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確診斷的三個(gè)階段。
我科早在全1國建立了系統(tǒng)性結(jié)1核病分子病理診斷技術(shù)的平臺(tái),率1先將分子病理診斷技術(shù)在結(jié)1核病中應(yīng)用并推廣,解決了傳統(tǒng)病理對(duì)菌陰肺結(jié)1核及肺外結(jié)1核病的診斷率低、結(jié)1核病與非結(jié)1核分枝桿1菌病無法鑒別以及耐藥結(jié)1核病無法診斷等難題。同時(shí),我科作為中華醫(yī)學(xué)會(huì)結(jié)1核病學(xué)分會(huì)金1牌病理培訓(xùn)基地,負(fù)責(zé)組織制定了結(jié)1核病病理診斷規(guī)范、培訓(xùn)了大量的專1業(yè)技術(shù)人員,為形成結(jié)1核病病理學(xué)綜合診治新模式做出了卓1越貢獻(xiàn)!
將少數(shù)菌落轉(zhuǎn)移到纖維素濾膜上
(1) 在含有選擇性的瓊脂平板上放一張纖維素濾膜。
(2) 用無菌牙簽將各個(gè)菌落先轉(zhuǎn)移至濾膜上,再轉(zhuǎn)移至含有選擇性但未放濾膜的瓊脂主平板上。應(yīng)按一定的格子進(jìn)行劃線接種(或打點(diǎn))。每菌落應(yīng)分別劃線于兩個(gè)平板的相同位置上。后,在濾膜和主平板上同時(shí)劃一個(gè)含有非重組質(zhì)粒的菌落。
(3) 倒置平板,于37℃培養(yǎng)至劃線的細(xì)菌菌落生長(zhǎng)到0.5-1.0mm的寬度。
(4) 用已裝防水黑色繪圖墨水的針頭穿透濾膜直至瓊脂,在3個(gè)以上的不對(duì)稱位置作標(biāo)記。在主平板大致相同的位置上也作上標(biāo)記。
(5) 用Parafilm膜封好主平板,倒置貯放于4℃,直至獲得雜交反應(yīng)的結(jié)果。
(6) 裂解細(xì)菌,按本段下面所述方法,使釋放的DNA結(jié)合于纖維素濾膜。
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