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玉米原位雜交檢測技術(shù)服務-科銳諾生物科技(在線咨詢)

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原位雜交是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行精1確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標本或組織標本上進行。

原位雜交的特點是雜交在顯微鏡載玻片上中期染色體標本上進行。所謂原位即指標本上DNA原位變性,在利用放1射性或非放1射性標記的已知核酸探針雜交后,通過放1射自顯影或非放1射性檢測體系來檢測染色體上特異DNA或RNA順序,可用放1射性顆粒在某條染色體的區(qū)帶出現(xiàn)的頻率或熒光的強弱來確定探針的位置,從而進行準確的基因定位。

原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,玉米原位雜交檢測技術(shù)服務,稱為原位雜交,使用DNA或者RNA探針來檢測與其互補的另一條鏈在細菌或其他真核細胞中的位置。

       原位雜交技術(shù)的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列,將有放1射性或非放1射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對,結(jié)合成專一的核酸雜交分子,經(jīng)一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件:組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結(jié)合的標記物

       

熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)是在20世紀80年代末在性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性分子細胞遺傳技術(shù),以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結(jié)合,雜交后再通過細胞化學過程連接上熒光染料[1,2].FISH的基本原理是將DNA(或RNA)探針用特殊的核苷酸分子標記,然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上,再用與熒光素分子偶聯(lián)的單與探針分子特異性結(jié)合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時顯示多種顏色等優(yōu)點,不但能顯示中期分裂相,還能顯示于間期核.同時在熒光原位雜交基礎(chǔ)上又發(fā)展了多彩色熒光原位雜交技術(shù)和染色質(zhì)纖維熒光原位雜交技術(shù).

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