武漢貝科新肽(圖)-原位雜交技術(shù)-原位雜交

詢盤留言 |投訴|申領(lǐng)|刪除 產(chǎn)品編號(hào)：581227615 更新時(shí)間：2024-07-05

武漢貝科新肽科技有限公司

主營業(yè)務(wù)：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動(dòng)子篩選
公司官網(wǎng)：bkxtbio.com.cn
公司地址：湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號(hào)紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號(hào)

業(yè)務(wù)熱線： 15002786799 (夏先生先生)

產(chǎn)品詳情
聯(lián)系方式

供貨總量 : 不限
價(jià)格說明 : 議定
包裝說明 : 不限
物流說明 : 貨運(yùn)及物流
交貨說明 : 按訂單

熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization，F(xiàn)ISH）是在20世紀(jì)80年代末在性原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種非性分子細(xì)胞遺傳技術(shù)，以熒光標(biāo)記取代同位素標(biāo)記而形成的一種新的原位雜交方法，探針首先與某種介導(dǎo)分子（reporter molecule）結(jié)合，雜交后再通過細(xì)胞化學(xué)過程連接上熒光染料.FISH的基本原理是將DNA（或RNA）探針用特殊的核苷酸分子標(biāo)記，然后將探針直接雜交到染色體或DNA纖維切片上，再用與熒光素分子偶聯(lián)的單與探針分子特異性結(jié)合來檢測DNA序列在染色體或DNA纖維切片上的定性、定位、相對(duì)定量分析.FISH具有安全、快速、靈敏度高、探針能長期保存、能同時(shí)顯示多種顏色等優(yōu)點(diǎn)，不但能顯示中期分裂相，還能顯示于間期核.同時(shí)在熒光原位雜交基礎(chǔ)上又發(fā)展了多彩色熒光原位雜交技術(shù)和染色質(zhì)纖維熒光原位雜交技術(shù).

預(yù)雜交

1）每個(gè)管中置換成大約300ulHYB－溶液，原位雜交，60℃水浴5分鐘，避免振蕩。

2）用等體積的HYB＋取代HYB－。

3）60℃水浴，原位雜交技術(shù)，預(yù)雜交4小時(shí)以上。

雜交

1）吸去預(yù)雜交的HYB＋，加上100ul已加入探針的HYB＋溶液（探針濃度約為1ng/ul）..

2）60℃ 溫浴過夜。

注：雜交與預(yù)雜交的溫度可以是55到60度不等，溫度越低，探針結(jié)合越好，溫度越高，背景越小。

同一樣本可以多次做原位雜交實(shí)驗(yàn)嗎?

一般情況下，植物組織原位雜交，如果操作沒有得到理想的結(jié)果，是可以將探針洗滌然后進(jìn)行再次的雜交的。如果使用的是直標(biāo)型探針，還可以使用不同探針對(duì)同一樣本進(jìn)行反復(fù)雜交。針對(duì)不同的樣本，處理方法略有不同。

原位雜交實(shí)操中哪些因素比較重要?

重要的因素：溫度、光照、濕度和試劑的PH值。溫度和濕度直接影響著探針和目標(biāo)DNA的雜交效率；光照影響著熒光染料的強(qiáng)度，所以探針要避光保存，其已經(jīng)雜交的片子可用防熒光淬火劑封片且避光保存；各種試劑pH也要達(dá)到要求，這也直接關(guān)系到原位雜交的穩(wěn)定性。

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