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貼片:切好的切片必須貼附于載玻片上才能作進一步處理,但是切片常有細(xì)小的橫紋,必須經(jīng)展平后才能貼附,否則影響染色和觀察。首先將連串的切片投入到44℃左右(視蠟的熔點而定,此溫度適合熔點為59℃左右的石蠟)的溫水浴中,這時切片都浮在水面上,由于表面張力的作用使切片自然展平,用鑷子將切片分開,然后用防脫玻片傾斜著插入水面去撈取切片,植物切片測試服務(wù),使切片貼附在載玻片的合適位置,于60℃ 烤箱烤片2個小時即可。

常見的生物切片,厚度一般在幾微米的程度,這種厚度制作起來比較簡單,除了可以使用自動化的設(shè)備來切片之外,手動操作也能切到這種厚度,而且完夠滿足光學(xué)顯微鏡下觀察的標(biāo)準(zhǔn)。不過在前沿的科研領(lǐng)域里,需要觀察更細(xì)微的細(xì)胞結(jié)構(gòu),甚至需要從分子的層面來進行研究,這時候就需要用到電子顯微鏡。然而電子顯微鏡也需要更薄的樣品,切片至少要達到0.1微米的厚度,而這種切片也就被稱為是超薄切片,在很多實驗研究里需要厚度達到50納米,顯然手I操作是無法達到這種厚度的。那么在實驗環(huán)境下是怎樣做成這種超薄生物切片的呢?首先是需要進行更好的固定,因為在如此薄的尺度之下,不但基本的細(xì)胞結(jié)構(gòu)都已經(jīng)被完全破壞,而且其中的細(xì)胞器也都被切開,里面的生物酶會釋放出來,并且在很短的時間內(nèi)使細(xì)胞結(jié)構(gòu)遭到破壞。所以就需要在取得樣品之后盡快進行固定,要求在一-分鐘之 內(nèi)完成這項操作,然后再使用對應(yīng)的材料來做透明化以及包埋,接下來還需要配合的切片機來完成切片的過程,從而達到理想的厚度。

HE染色法 ,石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 是蘇mu精 - 伊紅染色法的簡稱。

HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中基本、使用廣泛的技術(shù)方法。

胞核被蘇mu精 染成鮮明的藍(lán)色,骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。

HE染色法向您介紹著色的情況與組織或細(xì)胞的種類有關(guān),也隨其生活周期及病理變化而改變。H-E染色評定標(biāo)準(zhǔn):

(1)切片完整,厚度4-6微米,厚薄均勻,無皺褶無刀痕;

(2)染色核漿分明,紅藍(lán)適度,透明潔凈,封裱美觀。

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