外泌體研究開展的如火如荼。不論是 SCI 文章的發(fā)表還是各類基1金的申請,外泌體相關(guān)研究表現(xiàn)都非常亮眼。外泌體提取后,研究人員面臨的一個重要問題就是,我提取的是不是外泌體?如果是的話,質(zhì)量如何?
現(xiàn)階段,對外泌體進行鑒定主要有三種主流的方法:電鏡、粒徑和 Western blot 分析靶標(biāo)物。之前我們已經(jīng)對外泌體電鏡進行了總結(jié),今天我們來看看外泌體的粒徑分析。
外泌體粒徑分析原理
外泌體粒徑分析方法為納米顆粒跟蹤分析(Nanoparticle tracking Analysis, NT A),其原理是對每個顆粒的布朗運動進行追1蹤和分析,結(jié)合 Stockes-Einstein 方程式計算出納米顆粒的流體力學(xué)直徑和濃度。NT A技術(shù)已被外泌體研究領(lǐng)域認可為外泌體表征手段之一。相較于其他表征方式,NT A技術(shù)的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快。
外泌體不僅含有蛋白質(zhì)抗原,還含有分泌細胞來源的mRNA或non-coding RNA(特別是miRNA),其功能引起廣泛關(guān)注。外泌體的脂質(zhì)雙分子層膜可保護這些RNA,不被RNase分解,在血液、體液中穩(wěn)定存在。在外泌體及其分泌細胞中均可檢測出RNA,也存在僅能在其中之一檢測出RNA的情況,因此我們設(shè)想存在一種可以選擇性將特定的RNA吸收至外泌體的機制。
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