病理切片的制作步驟注意事項:切片刀必須鋒利,用力均勻,切片厚度3—5微米。切片完整無污染,無皺褶。
胃鏡、穿刺等小活檢組織切片必須作連續(xù)性切片,數(shù)量不得少于8張。
組織片貼附,應(yīng)在除去標(biāo)簽位置后玻片的中間,各塊組織的方向應(yīng)一致。
封固前必須經(jīng)酒精充分脫水,二甲1苯透明,濕封。
封片時不得有氣泡,不得有樹膠外溢。
標(biāo)簽必須貼于玻片左側(cè),編號字跡必須清楚。
取材后的制片工作一般應(yīng)在2個工作日內(nèi)完成。
切片完成后交付醫(yī)師時必須按照記錄當(dāng)面清點。
切片是制片技能中要求很高的步驟,即使同一蠟塊,使用同一臺切片機,不同的操作者也會切出不同質(zhì)量的片子。
保存條件:室溫干燥保存,一年內(nèi)有效。
使用說明:
封片方法很簡單,在載玻片中央滴2-3 滴樹膠液(注意要滴在-起否則容易有氣泡),然后把蓋玻片慢慢放上去,輕輕擠壓,樹膠液會向外側(cè)擴散至整個鏡片,通風(fēng)晾幾個小時后用棉球粘上透明劑或者把鏡片邊緣多余的樹膠擦洗干凈。然后再放在通風(fēng)處晾干,封片可常溫保存。
注意事項:
透明劑有毒,避免與皮膚或眼睛接觸。HE病理片子全景掃描提醒:封片時請注意通風(fēng)。中性樹膠透明度高,幾乎和光學(xué)玻璃一樣清晰,不腐蝕玻璃,因糨它是中性的,而玻璃怕堿性,如果不放心的可以在粘合以前用鹽酸酒精泡泡晾干再粘可能會更好哦。
HE病理片子全景掃描
常見的生物切片,厚度一般在幾微米的程度,這種厚度制作起來比較簡單,除了可以使用自動化的設(shè)備來切片之外,手動操作也能切到這種厚度,植物石蠟切片,而且完夠滿足光學(xué)顯微鏡下觀察的標(biāo)準(zhǔn)。不過在前沿的科研領(lǐng)域里,需要觀察更細微的細胞結(jié)構(gòu),甚至需要從分子的層面來進行研究,這時候就需要用到電子顯微鏡。然而電子顯微鏡也需要更薄的樣品,切片至少要達到0.1微米的厚度,而這種切片也就被稱為是超薄切片,在很多實驗研究里需要厚度達到50納米,顯然手I操作是無法達到這種厚度的。那么在實驗環(huán)境下是怎樣做成這種超薄生物切片的呢?首先是需要進行更好的固定,因為在如此薄的尺度之下,不但基本的細胞結(jié)構(gòu)都已經(jīng)被完全破壞,而且其中的細胞器也都被切開,里面的生物酶會釋放出來,并且在很短的時間內(nèi)使細胞結(jié)構(gòu)遭到破壞。所以就需要在取得樣品之后盡快進行固定,要求在一-分鐘之 內(nèi)完成這項操作,然后再使用對應(yīng)的材料來做透明化以及包埋,接下來還需要配合的切片機來完成切片的過程,從而達到理想的厚度。
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