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分子病理檢測的意義:

通過分子檢測協(xié)助病理診斷

某些腫1瘤具有特定的分子病理學(xué)改變,對于病理常規(guī)染色難于診斷的這些腫1瘤,進(jìn)行分子病理檢測可協(xié)助得出準(zhǔn)確的病理診斷。例如淋巴1瘤的鑒別診斷往往依賴于形態(tài)和免1疫組化的綜合判斷,但有些時候,這些手段也不能滿足診斷的需要,這時我們通過IG或TCR基因重排檢測,可協(xié)助鑒別淋巴細(xì)胞的普通增殖和腫1瘤性增殖。

滴加FITC-TSA:滴加FITC-TSA試劑,避光室溫反應(yīng)5min。后TBST洗3次×10min,分子病理技術(shù)服務(wù),PBS洗1次×5min。

DAPI復(fù)染核:切片滴加DAPI染液,避光孵育8min,沖洗后滴加抗熒光淬滅封片1劑封片。

鏡檢拍照:切片于尼康正置熒光顯微鏡下觀察并采集圖像。(紫外激發(fā)波長330-380nm,發(fā)射波長420nm,發(fā)藍(lán)光;FAM(488)綠光激發(fā)波長465-495nm,發(fā)射波長515-555 nm,發(fā)綠光;CY3紅光激發(fā)波長510-560,發(fā)射波長590nm,發(fā)紅光。)

分子病理應(yīng)用的檢測樣本主要包括石蠟組織、新鮮組織、脫落細(xì)胞、全血及其他體液等。石蠟切片標(biāo)本厚度應(yīng)在4-6μm,切片數(shù)量依據(jù)組織大小而定。樣本質(zhì)量對檢測結(jié)果和分析至關(guān)重要,病理醫(yī)師需要對可評估的樣本進(jìn)一步明確病理診斷,并評價標(biāo)本有無出血、壞死和不利于核酸檢測的前處理(例如含HCl脫鈣液處理),病變細(xì)胞(如細(xì)胞)的總量和比例,避免假陰性。進(jìn)行NGS檢測前需通過病理診斷明確其的性質(zhì)及含量,根據(jù)不同類型選擇合適的基因panel測序。組織標(biāo)本中細(xì)胞含量建議達(dá)到20%以上,低于此標(biāo)準(zhǔn)可富集后檢測。未經(jīng)病理評估的基因檢測結(jié)果不可單獨用于分子病理臨床診斷目的。

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