染色體原位雜交實驗的基本原理是利用特定標記的已知堿基序列的核酸探針,依據堿基互補配對原理,與中期染色體玻片標本中的同源 DNA 序列進行雜交。
標記可以用放1射性同位素(3H、35S、32P),然后進行放1射自顯影;也可以用非放1射性的熒光素生物素、地1高辛,再用熒光顯微鏡進行觀察,即熒光原位雜交(fluorescent in situhybridization,FISH)技術。
原位雜交是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行精1確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標本或組織標本上進行。
原位雜交的特點是雜交在顯微鏡載玻片上中期染色體標本上進行。所謂原位即指標本上DNA原位變性,在利用放1射性或非放1射性標記的已知核酸探針雜交后,染色體原位雜交測試服務,通過放1射自顯影或非放1射性檢測體系來檢測染色體上特異DNA或RNA順序,可用放1射性顆粒在某條染色體的區(qū)帶出現的頻率或熒光的強弱來確定探針的位置,從而進行準確的基因定位。
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