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PCR實驗室設(shè)計建設(shè)標(biāo)準規(guī)范
各區(qū)域的功能與設(shè)備
試劑制備區(qū)主要為擴增試劑的準備,分裝盒保存。主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機、加樣器、紫外燈。
樣品制備區(qū)主要是樣品的混樣和測試樣品的制備。其主要設(shè)備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水槽、上下水設(shè)備、廢棄物容器、紫外燈。操作臺是否使用生物安全柜、凈化工作臺,或工作臺,要根據(jù)樣品的性質(zhì)和制備要求來決定,如疾控中心、臨床醫(yī)學(xué)實驗室一般選擇生物安全柜,植物、檢疫等選擇柜。
擴散區(qū)為pcr擴增反應(yīng)系統(tǒng)的制備和模板的添加、核酸擴增。在生物安全柜(超凈臺)內(nèi)進行加樣,超凈臺氣流方向宜選用垂直式。冰箱,生物安全柜,離心加樣裝置,廢物容器,紫外燈等。
擴增產(chǎn)物分析區(qū)為擴增產(chǎn)物的分析區(qū)域。如果只使用全自動擴增檢測儀,可將擴增區(qū)與擴增產(chǎn)物分析區(qū)合并為一個區(qū)。本區(qū)域所使用的儀器設(shè)備有、、加樣器和水浴箱等。
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PCR實驗室管理細則規(guī)范:
嚴格按照“試劑儲存和準備區(qū)→樣品標(biāo)本處理區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)”的單向進行,不得逆向進入前一工作區(qū)。
非本實驗室工作人員,未經(jīng)允許不得進入。進修、實習(xí)或因科研活動需要進入實驗室的人員,進入各實驗區(qū)前須先熟悉本程序的各項規(guī)定,并在本實驗室人員監(jiān)督下,嚴格遵守執(zhí)行,
在各區(qū)域的實驗操作過程中,操作人員必須戴手套、口罩和帽子,并嚴格遵守操作規(guī)程。
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PCR實驗室管理細則規(guī)范:
試劑儲存和準備區(qū)只能用于試劑的貯存和配置。
樣品和標(biāo)本處理區(qū)只能進行臨床標(biāo)本的保存,核酸提取、保存及其加入至擴增反應(yīng)管,測定RNA時cDNA的合成。
擴增產(chǎn)物分析區(qū)只能進行DNA或cDNA擴增,實時熒光PCR擴增產(chǎn)物的分析。
PCR實驗危險性較大,稍微不注意就可能造成事故的發(fā)生,所以在PCR實驗室工作的人員要嚴格遵守上述規(guī)范。
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