外泌體電鏡檢測:外泌體是細胞外囊泡的一種,其膜來源與粒徑范圍與細胞外囊泡相似,胞外囊泡粒徑及濃度服務(wù),電鏡下,顯示出典型的茶托狀超微結(jié)構(gòu)。
透射電鏡作為鑒定外泌體的金標準,一直是科銳諾生物主營的業(yè)務(wù)之一。透射電鏡點分辨率可以達到0.1nm,非常適合用來觀察外泌體類囊泡??蛻糁恍枰乃托迈r或者凍存的外泌體樣品,我們負責(zé)從制片到觀察的全套檢測服務(wù)。經(jīng)過多年實操與研發(fā)經(jīng)驗,科銳諾已經(jīng)熟練掌握外泌體電鏡檢測。做過的樣品來源包括:常規(guī)細胞上清、外周血、尿液、腦脊液、肺泡灌洗液、組織提取液、乳液、汗液等來源的外泌體。分離方法包括:PEG沉淀法、蔗糖密度梯度離心法、差速超1速離心法、色譜柱法、親合法、超濾法、切向流、微流控等。對于不同來源,不同方法的樣品,實驗前,會進行詳細溝通及結(jié)果預(yù)估。結(jié)合NTA數(shù)據(jù),電鏡效果非??煽壳铱煽亍?測試周期為3-7個工作日。
外泌體作為活1細胞分泌的含有RNA 和蛋白質(zhì)的微囊泡,直徑為 30-150nm之間,廣泛分布于外周血、尿液、唾液、腹1水、羊水等多種體液中。研究表明,外泌體包含多種活性分子,如蛋白質(zhì)、脂肪和核酸(mRNA、miRNA 及其它非編碼RNA ) 等, 能作為信號分子傳遞給靶1細胞,介導(dǎo)細胞間的物質(zhì)傳遞與信息交流,文獻報道體液中外泌體 RNA (特別是miRNA 等非編碼RNA)在不同的疾病模型中存在明顯的表達差異。同時,這些分子被外泌體的脂膜所包裹和保護, 能保持其原有穩(wěn)定性和生物學(xué)功能, 已經(jīng)成為液體活檢的重要分子標志物。近年來, 外泌體已成為科研熱點,其在臨床上巨大的應(yīng)用價值, 引起了眾多研究者以及商業(yè)人士的濃厚興趣。隨著相關(guān)技術(shù)的發(fā)展, 有關(guān)外泌體在臨床疾?。ㄓ绕涫悄[1瘤)的早期診斷、治1療、預(yù)后及伴隨診斷的應(yīng)用研究正在蓬勃開展。通過高通量技術(shù)對外泌體 RNA進行測序, 可快速高1效獲得外泌體RNA 的全1面信息,是疾病診斷和隨訪的理想手段。透射電鏡作為鑒定外泌體的金標準,一直是科銳諾生物主營的業(yè)務(wù)之一。透射電鏡點分辨率可以達到0.1nm,非常適合用來觀察外泌體類囊泡??蛻糁恍枰乃托迈r或者凍存的外泌體樣品,我們負責(zé)從制片到觀察的全套檢測服務(wù)。一個樣品提供2個放大倍數(shù),10-15張照片。檢測周期為7個工作日。
在透射電鏡基礎(chǔ)上,用外泌體標記蛋白對外泌體進行免1疫標記,利用膠體金標記出外泌體表面的特定抗原的位置。結(jié)合透射電鏡形態(tài)學(xué)定性的特點,同時確定外泌體標記蛋白的位置。這樣同時從形態(tài)學(xué)及免1疫學(xué)原理上驗證外泌體。這樣數(shù)據(jù)結(jié)果中既可以獲得經(jīng)典形態(tài)的外泌體,又可以定性及定位外泌體表面的標志蛋白。這樣具有更充分的說服力。
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