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武漢貝科新肽科技有限公司
主營：原位雜交,亞細(xì)胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
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菌落的裂解及DNA結(jié)合于纖維素濾膜
（1） 在一張保鮮膜上制作一個(gè)裝有0.5mol/L NaOH的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，植物原位雜交，將濾膜放到小洼上，染色體熒光原位雜交，展平保鮮膜，使濾膜均勻濕潤，熒光原位雜交，讓濾膜留于原處2-3分鐘。
（2） 用干紙巾從濾膜的下方吸干濾膜，用一張新的保鮮膜和新配制的0.5mol/L NaOH重復(fù)步驟（1）。
（3） 吸干濾膜，將濾膜轉(zhuǎn)移到新的帶有1mol/L Tris·Cl(pH7.4）的保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜，再重復(fù)一次該步驟。
（4） 吸干濾膜，把它轉(zhuǎn)移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4）的保鮮膜小洼上5分鐘后吸干濾膜，轉(zhuǎn)移到一張干的濾紙上，置于室溫20-30分鐘，使濾膜干燥。
（5） 將濾膜夾在兩張干的濾紙之間，在真空烤箱中于80℃干烤2小時(shí)，固定DNA。
（6） 將固定在膜上的DNA與32 P標(biāo)記的RNA進(jìn)行雜交。
植物組織原位雜交的步驟包括以下幾個(gè)方面：
1. 制備組織樣品：從植物中取出需要研究的組織樣品，如根、莖、葉等。
2. 固定組織樣品：將組織樣品固定在載玻片上，通常使用或乙醇等化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行固定。
3. 處理組織樣品：對固定的組織樣品進(jìn)行脫水、透明化、脫脂等處理，以便于DNA探針的穿透和結(jié)合。
4. 制備DNA探針：根據(jù)需要研究的基因序列，設(shè)計(jì)并合成DNA探針。DNA探針可以標(biāo)記熒光染料或性同位素，以便于檢測。
5. 雜交DNA探針：將DNA探針與組織樣品進(jìn)行雜交，通常需要在高溫下進(jìn)行，以便于DNA探針與RNA或DNA結(jié)合。
6. 檢測雜交信號：通過熒光顯微鏡或計(jì)數(shù)器等設(shè)備，檢測DNA探針與RNA或DNA的結(jié)合情況，確定目標(biāo)基因的表達(dá)模式和位置。
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第2年
