樣本準(zhǔn)備
1. 提供外泌體懸液即可,未純化樣本也可以上機(jī)檢測;
注意:NTA僅提供粒徑分布情況和顆粒濃度,無法區(qū)分外泌體與非外泌體成分;當(dāng)然也可先利用外泌體特異性標(biāo)記物進(jìn)行熒光標(biāo)記,則可以獲知外泌體特定亞群的含量。
2.儀器的檢測區(qū)間是10^7 particles/ml,且有濃度檢測下限,為10^5 particles/ml,進(jìn)樣量不少于2ml;一般來說,會(huì)對樣本稀釋后進(jìn)樣;
我司無法準(zhǔn)確建議送樣量;檢測需要量與樣本本身濃度有關(guān),樣本濃,則用量小,反之則多,根據(jù)檢測經(jīng)驗(yàn),樣本取用量一般在2μl-100μl不等,取用量大于50μl時(shí)大多由于樣本分泌量過低、提取失敗或者對樣本有過多稀釋。一般建議送樣量不低于30μl,如樣本珍貴,可聯(lián)系我司寄回,運(yùn)費(fèi)視具體情況收取。
外泌體研究開展的如火如荼。不論是 SCI 文章的發(fā)表還是各類基1金的申請,外泌體相關(guān)研究表現(xiàn)都非常亮眼。外泌體提取后,研究人員面臨的一個(gè)重要問題就是,我提取的是不是外泌體?如果是的話,質(zhì)量如何?
現(xiàn)階段,對外泌體進(jìn)行鑒定主要有三種主流的方法:電鏡、粒徑和 Western blot 分析靶標(biāo)物。之前我們已經(jīng)對外泌體電鏡進(jìn)行了總結(jié),今天我們來看看外泌體的粒徑分析。
外泌體粒徑分析原理
外泌體粒徑分析方法為納米顆粒跟蹤分析(Nanoparticle tracking Analysis, NT A),其原理是對每個(gè)顆粒的布朗運(yùn)動(dòng)進(jìn)行追1蹤和分析,結(jié)合 Stockes-Einstein 方程式計(jì)算出納米顆粒的流體力學(xué)直徑和濃度。NT A技術(shù)已被外泌體研究領(lǐng)域認(rèn)可為外泌體表征手段之一。相較于其他表征方式,胞外囊泡粒徑及濃度技術(shù)服務(wù),NT A技術(shù)的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態(tài)、檢測速度更快。
關(guān)于真皮層方面1. 促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖能力成纖維細(xì)胞是真皮層主要的細(xì)胞,在體內(nèi)幾乎不增殖,且隨著年齡增長其數(shù)量和活性也隨之下降,其功能受損及細(xì)胞外基質(zhì)的改變與外源性皮膚老化密切相關(guān)。
外泌體可增強(qiáng)成纖維細(xì)胞的增殖能力,具有濃度依賴性,可逆轉(zhuǎn)紫外線誘導(dǎo)的成纖維細(xì)胞老化,但對內(nèi)源性老化因素所致細(xì)胞衰老作用不明顯。
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